嘔吐毒素親和柱的原理和使用注意事項

原理

樣品經(jīng)提取液提取、過濾、稀釋，然后通過鍵合有嘔吐毒素特殊抗體的免疫親和柱。此時，嘔吐毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱IAC-SEP上的雜質(zhì)除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將嘔吐毒素從親和柱上洗脫下來。最后，用HPLC或熒光計進行定量檢測

注意事項

1. 使用前，免疫親和柱需回至室溫（22～25℃）。

2. 樣品添加回收試驗時，標準品添加到樣品中，靜置2小時后或過夜，再進行樣品前處理，否則會出現(xiàn)回收率偏低的現(xiàn)象。

3)     操作步驟中，樣品過柱，淋洗，洗脫時，一定要控制好流速，不能太快，否則會使檢測結(jié)果偏低。

4)     如果將標準品直接過柱驗證回收率時，一定要確保標準上柱液中甲醇濃度不要超過5%，否則會影響柱子的吸附能力。

5)     試驗中使用的玻璃儀器等，一定要清洗干凈，尤其是用次氯酸等處理過的儀器，否則會使檢測結(jié)果偏低。

6)     當(dāng)用氮氣濃縮洗脫液時，氮氣流不要太大，否則會損失部分嘔吐毒素。